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首先保證工作環境干凈整潔，細胞間每周定期進行紫外殺菌，每次30分鐘。細胞間內保持穩定的溫度、濕度及換氣。

細胞實驗中涉及的儀器，如：離心機、細胞計數儀、倒置顯微鏡、冰箱等盡量放到細胞間使用，這樣可以保證和環境一起殺菌，保證儀器干凈整潔，不做其他實驗使用。

將要使用的耗材提前放到細胞間內，減少無關物品進入細胞間。在實驗過程中減少細胞間門的開關次數，保證環境無菌。

準備好純水要高壓滅菌后放到生物安全柜中，用來配制藥品試劑等。

抗生素提前配好，用過濾器過濾后分裝，放到-20℃冰箱中保存備用。也可以直接用帶有抗生素的培養基。

需要用的血清、胰酶要提前放到4℃冰箱中解凍。血清一般會放到-80℃保存，要逐步解凍，直接放到37℃解凍會出現絮狀物會影響后期使用。

操作前要把培養基、胰酶放到37℃細胞培養箱中復溫，減少低溫對細胞的刺激。

將本次實驗需要使用的物品移液器、槍頭、移液管等提前放到生物安全柜中，打開紫外燈滅菌20-30分鐘。

進入細胞間前要按順序進行自身防護，在緩沖間換好、戴好：拖鞋、帽子、口鼻防護罩、白大衣、手套。拖鞋和白大衣要是細胞間專用。

在操作前，先用酒精給手套消毒；打開生物安全柜，將工作臺用酒精棉球擦拭一遍，等酒精揮發后，進行細胞實驗操作。

拿入到安全柜里面的物品都要用酒精噴灑消毒。

培養基、血清、胰酶等大包裝的試劑一定要進行分裝到50mL、15mL離心管中使用，避免污染。如果不小心污染也不會浪費大部分試劑。

觀察培養箱中的細胞，用顯微鏡觀察細胞生長密度、生長狀態，是否染菌。培養基的消耗情況，如出現培養基變黃表示細胞需要換液，培養基營養耗盡。

凡是在安全柜中打開的瓶子，用完要及時蓋好，避免污染。在瓶蓋打開過程中，盡量不要從其上方經過，避免細菌掉入。

做完實驗收拾工作臺，清理垃圾，物品歸位。用酒精擦拭工作臺，打開紫外燈照射20-30分鐘。